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前言

部分 显微镜及其制片技术

实验一 普通光学显微镜的使用及装片制备 3

实验二 特殊光学显微镜的原理及使用 12

实验三 激光共聚焦扫描显微镜的原理及使用 24

实验四 透射电子显微镜原理及样品制备 28

实验五 扫描电子显微镜原理及样品制备 35

二部分 基础实验

实验六 细胞显微结构观察 41

实验七 细胞器的染与观察 45

实验八 叶绿体的分离纯化与荧光观察 51

实验九 细胞骨架的染与观察 54

实验十 核酸的细胞化学 59

实验十一 细胞膜生理 63

实验十二 细胞增殖与染备技术 74

实验十三 植物原生质备与培养 80

实验十四 动物细胞培养 87

实验十五 细胞周期与细胞凋亡 93

三部分 综合实验

实验十六 流式细胞术检测细胞周期中DNA的量 101

实验十七 单细胞凝胶电泳检测细胞中DNA链的断裂 105

实验十八 植物细胞染体显带与核型分析 110

实验十九 植物原生质体的分离及外源基因的瞬时表达 118

实验二十 体外培养细胞的冻存？复苏和活力测定 121

四部分 设计实验

实验二十一 植物组织培养 127

实验二十二 动物细胞融合 134

实验二十三 细胞凋亡的生化特征检测 137

实验二十四 细胞异常分裂与染体畸变的诱导及观察 140

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谁思考问题

　　1.荧光显微镜有哪些特有的装置？

　　2.荧光显微镜使用时的作要点和注意事项有哪些？

　　参考文献

　　杨汉民.1997.细胞生物学实验.2版.北京：高等教育出版社

　　郑国铝，谷祝平.1993.生物显微技术，北京：高等教育出版社

　　.相差显微镜

　　实验目的

　　1.了解相差显微镜的基本构成和基本原理。

　　2.初步掌握相差显微镜的作和应用。

　　实验原理

　　光波有振幅（亮度）、波长（颜）及相位（指在某一时间上光的波动所能达到的位置）的不同。当光通过物体时，如波长和振幅发生变化，人们的眼睛才能观察到，这是普通显微镜下能够观察到染标本的原因。而活细胞和未经染的生物标本，因细胞各部分微细结构的折射率和厚度略有不同，光波通过时，波长和振幅并不发生变化，仅相位发生变化产生相差，而人眼是无法鉴别这种微小的相差变化，故在普通显微镜下难以观察到。相差显微镜通过特殊的部件与光路设计能够实现直射光或衍射光的相位改变，并且利用光的衍射和干涉原理，把相位差变成振幅差（明暗差），同时它还吸收部分直射光线，以增大其明暗的反差。因此相差显微镜适合于观察活细胞或未染标本。

　　相差显微镜（图2-2）与普通显微镜的主要不同之处是：用坏状光阑代替可变光阑，用带相板的物镜（通常标有pH的标记）代替普通物镜，并带有一个合轴用的望远镜（图2-3）。环状光阑安装在转盘聚光器内部，是由大小不同的环状孔形成的光阑（图2-4），使用中将与不同的物镜相匹配。相板安装在物镜的后焦面处，相板装有吸收光线的吸收膜和推迟相位的相位膜。它除能推迟直射光线或衍射光的相位以外，还有吸收光使亮度发生变化的作用。合轴调节望远镜是用行合轴调节的。相差显微镜在使用时，聚光镜环状光阑的中心与物镜光轴要在一直线上，必需调节光阑的亮环和相板的环状圈重合对齐，才能发挥相差显微镜的效能。否则直射光或衍射光的光路紊乱，应被吸收的光不能吸收，该推迟相位的光波不能推迟，失去了相差显微镜的作用。......

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